培養(yǎng)基的pH如何依據(jù)成分與條件考慮

    細(xì)菌、放線菌的生長(zhǎng)繁殖對(duì)pH一般要求偏堿，霉菌和酵母菌要求偏酸。因此，分離培養(yǎng)基的pH應(yīng)該調(diào)節(jié)到被分離微生物要求范圍。這不僅有利于自身生長(zhǎng)，也可排除一部分不需要的菌類(lèi)。例如，分離檸檬酸產(chǎn)生菌的黑曲霉，就是利用調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的酸堿度獲得成功的。其分離方法是：取紅芋粉醪20%、檸檬酸0%～20%配成培養(yǎng)液，調(diào)節(jié)pH2.0～2.5，以一定量的培養(yǎng)基和土樣均勻混合，用毛細(xì)吸管點(diǎn)種在平皿內(nèi)事先覆蓋的無(wú)菌濾紙上（2～3層），于30℃培養(yǎng)，這樣可以分離到產(chǎn)生檸檬酸的黑曲霉。

    分離堿性蛋白酶和堿性脂肪酶產(chǎn)生菌時(shí)，可以把培養(yǎng)基調(diào)到pH9～，在此范圍內(nèi)不宜生長(zhǎng)的微生物被抑制，這對(duì)分離培養(yǎng)基本身起到濃縮作用。大多數(shù)水解酶的生長(zhǎng)zui適pH基本相近，而酶的作用pH未必與產(chǎn)酶pH相同。

    培養(yǎng)基的pH要結(jié)合營(yíng)養(yǎng)成分和培養(yǎng)條件來(lái)考慮。因?yàn)槲⑸镌谏L(zhǎng)繁殖過(guò)程中，由于代謝作用會(huì)產(chǎn)生酸性或堿性產(chǎn)物，pH發(fā)生變化，微生物生長(zhǎng)受到抑制。一般培養(yǎng)基中碳氮比（C/N）高者，培養(yǎng)后傾向于酸性，反之則傾向于堿性。無(wú)機(jī)鹽的性質(zhì)也會(huì)影響pH變化，（NH4）2SO4是生理酸性無(wú)機(jī)氮源，其中NH4+被菌體利用，留下SO42—，培養(yǎng)液變成酸性。而NaNO3是生理堿性氮源，其中NO3—被菌體分解利用后，剩余Na+，使培養(yǎng)液變成堿性。如發(fā)酵過(guò)程缺氧，則代謝向有機(jī)酸合成方向進(jìn)行，pH下降。為了維持培養(yǎng)基的ph，一般要加磷酸鹽，如K2HPO4、KH2PO4，使培養(yǎng)基具有一定的緩沖能力。如果培養(yǎng)液中的酸堿變化很大，磷酸鹽的緩沖容量不足以調(diào)節(jié)pH變化，則可適當(dāng)加入碳酸鈣，以不斷中和菌體代謝過(guò)程中產(chǎn)生的酸類(lèi)，使培養(yǎng)基的pH能保持在恒定的范圍內(nèi)。此外，在分離霉菌時(shí)，加幾滴乳酸不僅可以維持一定酸堿度，而且可以抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。

250克 Bacto-Agar 培養(yǎng)基細(xì)菌瓊脂粉 BR
00克 Bile powder of cow 牛膽汁粉 BR，40%
00克 Bile powder of pig 豬膽汁粉 BR
250克 OX Bile dihydrate purified 脫氫牛膽粉 BR
250克 Beef extract powder 小牛浸膏粉 BR
500克 Meat extracts beef 牛肉膏 BR
250克 Yeast extract powder 酵母粉 BR
500克
500克 Yeast extract 酵母浸膏 BR
25克 Bile salt No. 3 3號(hào)膽鹽 BR，90%
25克 Bile salt No. 5 5號(hào)膽鹽 BR，70%
25克 Bile salt No.7 7號(hào)膽鹽 BR
25克 Bile salt from sheep 羊膽鹽 BR
25克 Bile salt from ox 牛膽鹽 BR，60%
公斤
25克 Bile salt from pig 培養(yǎng)基豬膽鹽 BR，65%
公斤
25克 Bile salt from poultry 禽膽鹽 BR
250克 Casein acid hydrolysate 酸水解酪蛋白 BR
公斤
00克 Casamino acid 酪蛋白水解物 BR