小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白  NGALELISA試劑盒 酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
使用說明書elisa法測定
規(guī)格：48T/96T
本試劑盒僅供體外研究使用!
ELISA法定量測定人尿液或其它相關生物液體中小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白  NGALELISA試劑盒的含量。
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 操作步驟 實驗開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白  NGALELISA試劑盒 檢測范圍。 

. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?/font>00μl，余孔分別加標準品或待測樣品00μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應20分鐘。 

為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。 

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加標記抗體工作液 00μl（取μl標記抗體加99μl標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制），37℃,60分鐘。 

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。  

4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同標記抗體工作液） 00μl，37℃，60分鐘。 

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡-2分鐘，200μl/每孔，甩干。 

6. 依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）。 

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。 

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后5分鐘以內(nèi)進行檢測。