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U25(膠質(zhì)瘤細胞) 培養(yǎng)細胞注意事項:
實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉(zhuǎn)0分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)0分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。
U25(膠質(zhì)瘤細胞)無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實驗用品用完即應移出,以利于氣流之流通。實驗用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在抬面之無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
工作人員應注意自身之安全,須穿戴實驗衣及手套后才進行實驗。對于來自人類或是病毒感染之細胞株應特別小心操作,并選擇適當?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少ClassⅡ)。操作過程中,應避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。
定期檢測下列項目:5.CO2鋼瓶之CO2壓力5.2CO2培養(yǎng)箱之CO2濃度、溫度、及水盤是否有污染(水盤的水用無菌水,每周更換)。5.3.無菌操作臺內(nèi)之airflow壓力,定期更換紫外線燈管及HEPA過濾膜,預濾網(wǎng)(300小時/預濾網(wǎng),3000小時/HEPA)。6.水槽可添加消毒劑(Zephrin:750),定期更換水槽的水
粉末培養(yǎng)基配制好后(加了血清),一般在4度盡量不要超過個月,如在-20度存放時間可長一些,但也不要超過3-4個月,可能對于永生化細胞株來說要求不是太高,細胞嬌弱,放置時間不宜過長。
開紫外線照射臺的時候,就將培養(yǎng)基、酶、DHANKS液那到室外讓它自然升溫。這樣40分鐘后,溫度也升上來了。有很多人將他放到37度水浴鍋里加熱。一定要注意水浴鍋的衛(wèi)生,有的常年不清洗,里面很臟,容易在外面瓶身上吸附大量細菌。因此用它的也一定要勤換水。從水浴鍋拿出后,找個毛巾擦干上面的水。
細胞 停滯期(Stagnate phase) 細胞數(shù)量達到飽和密度后,如不及時進行傳代,細胞就會停止增殖,進入停止期。此時細胞數(shù)持平,故也稱平臺期(Plateau phase)。停滯期細胞雖不增殖,但仍有代謝活動。如不進行分離傳代,細胞會因培養(yǎng)液中營養(yǎng)耗盡、代謝產(chǎn)物積聚、pH 下降等因素中毒,出現(xiàn)形態(tài)改變,貼壁細胞會脫落,嚴重的會發(fā)生死亡,因此,應及時傳代。
公司更多產(chǎn)品信息:653 3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂3%食塩アカルリ性ペプトン水3% NaCl Triple Soy Agar 50g/瓶 用于副溶血性弧菌純化
654 3%氯化鈉三糖鐵瓊脂3%食塩 TSI 寒天3% TSI Agar 50g/瓶 副溶血性弧菌生化試驗
655 我妻氏血瓊脂基礎我妻氏血液寒天基礎Wagstsuma Blood Agar Base 50g/瓶 用于副溶血性弧菌神奈川試驗,每00ml 培養(yǎng)基中需添加 5ml5070
656 四號瓊脂基礎四號寒天基礎No.4 Agar Base 50g/瓶 用 于 霍 亂 弧 菌 選 擇 性 分 離 , 每00ml 培養(yǎng)基中添加 支 058
657 瓊脂基礎ゲンタマイシン寒天基礎Gentamicin Agar Base 50g/瓶 用 于 霍 亂 弧 菌 選 擇 性 分 離 , 每00ml 培養(yǎng)基中添加 支 0543
658 嗜鹽菌選擇性瓊脂好塩選択性寒天Halophilic Bacteria Selective Agar 50g/瓶 含 4%NaCl,用于副溶血性弧菌的純 化
659 氯化鈉多粘菌素 B 肉湯(SPB)基礎SPB 基礎Sodium Chloride Polymyxin Broth 鹽suan"鹽 D-Tryptophan methyl ester hydrochloride
058 L-半胱氨suan"甲酯鹽suan"鹽/L-鹽suan"半胱氨suan"甲酯/L-半胱氨suan"甲醇酯延suan"鹽/L-Cysteine methyl ester hydrochloride BR,99%,具刺激性 8598-63-5 8598-63-5L-半胱氨suan"甲酯鹽suan"鹽 L-半胱氨suan"甲酯鹽suan"鹽 L-Cysteine methyl ester hydrochloride
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